ERITROCITI. bikonkavnog oblika, bez jezgre, životni vijek oko 120 dana. bikonveksnog oblika sa jezgrom, u ptica životni vijek oko 42 dana

Transcription

1 BROJENJE ERITROCITA

2 Ciljevi Opisati građu i funkciju eritrocita sisavaca Opisati građu i funkciju eritrocita peradi Opisati metode brojanja krvnih stanica: automatski brojači, brojanje u hemocitometru Izračunati broj eritrocita u uzorku krvi Opisati retikulocite, način bojanja i brojanja retikulocita

3 ERITROCITI - u sisavaca: bikonkavnog oblika, bez jezgre, životni vijek oko 120 dana - u ptica, riba i nižih filogenetskih vrsta: bikonveksnog oblika sa jezgrom, u ptica životni vijek oko 42 dana

4 INDIKACIJE sistematski pregledi prije kirurških zahvata i sl. prije kemoterapija ili zračenja hematološkim problemima krvarenja kronične anemije policitemije

5 smanjen broj eritrocita: akutna krvarenja kronična krvarenja trudnoća deficit željeza deficit vitamina B12 difunkcija koštane srži kronične upale povećan broj eritrocita: život na višim nadmorskim visinama utreniranost pušenje dehidracija plućne bolesti (HIPOKSIJA) srčane bolesti bubrežne bolesti (eritropoetin)

6 BROJENJE ERITROCITA Broj krvnih stanica (eritrocita, leukocita, trombocita) može se odrediti pomoću elektronskog brojača ili brojenjem u komorici hemocitometru. ELEKTRONSKI BROJAČI - metoda impedancije - optička metoda

7 BROJENJE ERITROCITA U HEMOCITOMETRU Pribor: - eritrocitni melanger - komorica za brojenje stanica (hemocitometar): Neubaerova, Bürker-Türkova, Spencerova Materijal: puna krv Otopine: Hayemova otopina

8 Eritrocitni melanžer Razrjeđenje krvi s HAYEMOVOM otopinom: 200x 100x krv se navuče do oznake 0,5 a Hayemova otopina do oznake 101 krv se navuče do oznake 1 a Hayemova otopina do oznake 101

9 Komorica (hemocitometar)

10 Prikaz ugravirane mrežice u hemocitometru 1 mm

11 Prikaz ugravirane mrežice u hemocitometru

12 Prikaz ugravirane mrežice u hemocitometru Polja za brojenje LEUKOCITA: 1, 3, 7, 9 Polje za brojenje ERITROCITA: 5

13 Prikaz ugravirane mrežice u hemocitometru Polje za brojenje eritrocita 5

14 Prikaz polja za brojenje eritrocita

15 Prikaz polja za brojenje eritrocita Eritrociti se broje na polju br 5 ili 1/400mm 2 ili

16

17 Pravilo brojenja: U svakom malom kvadratiću broje se svi eritrociti koji se nalaze: unutar kvadratića na lijevoj i gornjoj liniji

18 RAČUN N 80* x 400 x 10** x razrjeđenje (100 ili 200) = X [mm3 ] X [mm 3 ] x 10 3 = X [cm 3 ] X [cm 3 ] x 10 3 = X [dm 3 ] = X [L] N - broj izbrojenih eritrocita broj eritrocita u 1 mm 2 (površina malog kvadratića = 1/400 mm 2 ) * dijeli se s 80, zbog toga što se eritrociti broje u 80 malih kvadratića 100 ili razrjeđenje krvi u melanžeru ** množi se s 10 da bi se dobio broj eritrocita u 1 mm 3 zbog dubine komorice 0,1 mm

19 VRSTA ŽIVOTINJE Broj eritrocita N x10 12 /L HEMOGLO BIN g/l HEMATO KRIT % MCV fl MCH pg MCHC % KONJ GOVEDO OVCA KOZA , SVINJA PAS MAČKA KUNIĆ 5,5-6, KOKOŠ 2,5-3,

20 RETIKULOCITI Nezreli oblici eritrocita, koji sadrže ostatke RNA, mitohondrija i organela Procjena eritropoetske aktivnosti koštane srži broja: nakon dugotrajnog gubitka krvi i hemolize u ranoj anemiji uzrokovanoj manjkom željeza

21 ODREĐIVANJE BROJA RETIKULOCITA po Dacie-u i Lewis-u U omjeru 1:1 pomiješaju se 1% otopina BRILJANT KREZIL MODRILA i uzorak krvi ostavi se stajati min. u termostatu na 37 C napravi se razmaz i osuši Mikroskopiranje pod imerzijom: ostaci RNA, mitohondrija i organela obojeni su TAMNOPLAVO Broji se (100, 200 ili 1000 eritrocita) i izrazi % retikulocita

22 KRVNI RAZMAZ RETIKULOCITA

23 Retikulocit

24 Retikulocit

25 U pasa (0-1,5), mačaka (0,2-1,6) i svinja (0-1) u cirkulaciji nalazimo mali broj retikulocita, krave (0), ovce (0), koze (0) često uopće nemaju retikulocita, a u konja ih ne nalazimo.

26 ?

27 Literatura Feldman, B. V., J. G. Zinkl, N. C. Jain (eds.) (2000): Schalm s Veterinary Hematology, 5th ed. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, Baltimore, New York, London, Buenos Aires, Hong Kong, Sydney, Tokyo; USA, UK, Argentina, China, Australia, Japan. Harvey, J. W. (2001): Atlas of veterinary hematology: blood and bone marrow of domestic animals. W.B. Saunders Company, Philadelphia, Pennsylvania, USA. Kaneko, J. J., J. W. Harvey, M. L. Bruss (eds.) (1997): Clinical biochemistry of domestic animals, 5th ed. Academic Press, San Diego, CA, USA. Rebar, A. H. (1998): Hemogram Interpretation of Dogs and Cats. Ralston Purina Company, Saint Louis, Missouri, USA.