ODREDIVANJE ORGANOHLORNIH INSEKTICIDA U MLEKU

Transcription

1 APTErF, 31, (2000) UDC : : IBLlD: , (2000) 31, pp ODREDIVANJE ORGANOHLORNIH INSEKTICIDA U MLEKU Goran M. Petrovic, Blaga C. Stojceva Radovanovic V ovom radu izvrseno je kvalitativnoi kvantitativnoodredivanje devet, najce.\:ce upotrebljavanih, nejonizovanili organohlornih insekticida u mleku. Istraiivanje je izvrseno na tri razlicita uzorka mleka. Odredivanje tragova insekiicida je izvrseno na Perkin Elmergashromatografu sa EC detektorom, u heksanu kao rastvaracu, metodom internog standarda. Takode je izvrseno i odredivanje tragova insekticida u cistom heksanu. Dobijenirezultatipokazuju da su nadenezanemarliive kolicineispitivanili insekticidau heksanu i neznatne kolidne u svakom od ispitivanih uzoraka mleka. Samo po jedan razliciti insekticid u svakom od uzoraka mleka, je odreden u koncentraciji za nekoliko procenata vecoj od maksimalno dozvoljene koncentracije date Jugoslovenskimzakonom 0 zastiti zdravlja. KUUCNE RECI: mleko, organohlorniinsekticidi,gasna hromatografija UVOD Uslcd sve veceg zagadenja zivotne srcdinc mnogim toksicnim hemijskim jedinjenjima, poscbno pesticidima, danas se u razvijenim zemljama vrlo intenzivno proucavaju mogucnosti njihovc racionalne prirnene. Zhog nestrucne i ncracionalnc primene pesticida, tragovi ovih hemijskih jedinjenja se u vccoj iii manjoj meri mogu naci u gotovo svim zivotnim namirnicama, zhog cega postoji potencijalna opasnost trovanja i prouzrokovanja kancerogenih oboljenja coveka (1). Nase ispitivanje obuhvata kvalitativnu i kvantitativnu analizu odabranih organohlornih insckticida u mleku koji su deponovani u rnlecnoj masti (2). Kao analiticka metoda upotrebljena jc gasna hromatografija. Ovom metodom se mogu odrediti nejonski organohlorni insekticidi: aldrin, dieldrin, DDT, heksahlor, heptahlor, heptahlor epoksid idr. Mr. Goran M. Petrovic, asistcnt; Dr. 81aga C. Stojccva Radovanovic, red. prof., Univerzitet u Nisu, Filozofski fakultet, Nis, Cirila i Metodija 2, Jugoslavija. 131

2 EKSPERIMENTALNI DEO Koriscena metoda odredivanja insekticida se primenjuje za masti i ulja i za namirnice koje sadrze ove konstituente kao sto su: mleko, sir, meso, riba icir (3,4). Uzeta su za analizu tri uzorka kravljeg mleka razlicitog porekla: 1. Mleko sa podrucja "Trupale" (otkupna stanica), uzorkovano goci; 2. Mleko "PKB-Imlek" - Beograd, polipak pakovanje od god; 3. Mleko "Niska mlekara" - Nis, PVC pakovanje oci god. Od svakog uzorka radene su po dye probe, a rezultati su prikazani kao srednja vrednost rezultata dobijenih za svaku probu ponaosob. Usled razlicite kolicine izdvojene rnlecnc masti iz razlicitih uzoraka, odvage su bile sledece: - 3 g mlecne masti iz loog mleka sa podrucja Trupale, 4,1% mlecne masti; - 2,5 g rnlecne masti iz 100g mleka PKB-Imlek, 2,9% rnlecne masti; - 2 g mlecne masti iz loog mleka "Niska mlekara", 2,6% mlccnc masti. Masti (ulje) i ostaci pesticida se ekstrahuju iz uzorka. Alikvotni deo masti se rastvara u petrol-etru a ostaci pesticida se reekstrahuju iz rastvora u acctonitrii. Rastvor acetonitrila se razblazuje vodom, a ostaci pesticida ponovo ekstrahovanjcm prevode u petrol-etar i oslobadaju necistoca pomocu kolone sa Flofisilom i eluiranjem sa smesorn etil etra i petrol-etra. Sadrzaj ostataka pesticida se odreduje pornocu gasne hromatografije. Odmeri se 100 g mlcka i prenese u kivetu za centrifugiranje, doda 100 ml etanola i 1 g Na 2C204 i dobro promesa, Zatim se dod a 50 ml etil etra i snazno mucka 1 min. Doda se 50ml petrol etra i po novo snazno mucka 1 min, eentrifugira 5 min na 1500 min:' a zatim se rastvor prenese u levak za razdvajanje. Reekstrakeija ostataka pesticida vrsi se civa puta sa po 50 ml mesavine rastvora etil i petrol etra (1+ 1), ekstrakt centrifugira i prenese u levak za razdvajanje. Ekstrakt se ispere vodom. Etarski rastvor se susi propustanjern kroz kolonu sa Na 2S04 Petrol etar se uklanja na vodenom kupatilu pomocu strujc toplog vazciuha. OcImeri se :$ 3 g masti i prenese u levak za razcivajanjc. Uzorku se docia petrol-etar u zapremini koja je ciovoljna cia bude ukupno 15 ml rastvora. Rastvor se ekstrahuje tri puta sa po 30 ml aeetonitrila zasicenog petrol etrom, a ekstrakti se sukcesivno dociaju u levak za razcivajanje u kojem se vee nalazi 650 ml vode, 40 ml zasiccnog rastvora NaCI i 100 ml petroletra. Posle razcivajanja slojeva vocieni sloj se ocibaei. Kombinovani ekstrakti se ciobro ispcru vociom a ekstrakt se osusi propustanjern kroz kolonu sa anhicirovanim Na?S04' Osuscni ekstrakt prenese se u koneentrator po Kuderna-Danishu i koneentrujc cio zaprcrnine od 5-10 m!' Ekstrakt se dalje preciscava pornocu kolone sa Florisilom. Kolona sa prethodno pripremljenim Florisilom (unutrasnjeg precnika 22 mm) priprema se tako cia se u njoj nalazi sloj Florisiia duzine 10 em, a na samom vrhu kolone nalazi sc I em anhicirovanog Na 2S04 Uzorak se eluira brzinom oci 5 ml/min sa 200 ml 6%-tne smcse etiletra i petrol-etra, Promeni se posucia za prihvat eluata i kolona eluira upotrebom 200 ml 15%-tne rnesavine etil-etra i petrol-etra, Posle promene posude za prihvat eluata, kalona se eluira i sa 200 ml 50%-tnc mesavine etil-etra i petrol-etra, Svaki ociova 3 cluata koncentruje se zasebno cio 10 m!' Ako prvi eluat nije ciovoljno cist, preciscavanje se moze ponoviti sa novom kolonom sa Florisilom, iii upotrebiti drugu kolonu za preciscavanje. Sadrzaj ostataka pestieida u ova tri eluata odreduje se pornocu gasne hromatografije (5). Detekcija ostataka pestieicia izvrsena je na Perkin Elmer 8500 gasnom hromatografu sa EC (cietektor sa elektronskim zahvatom) detektorom, u heksanu kao rastvaracu, RacIni uslovi gasnog hromatografa su: 132

3 - Staklena kolona 2m duzine; - GP 1,5 SPTII ,95% SpTH-2401, velicina cestice 100/120 Mesa; - Temperatura injektora 285 C; - Temperatura detektora 285 C; - Gas nosac - N ; 2 - Protok gas a - 45 ml/min; - Pritisak - 17,0 PSIG. REZULTATI I DISKUSIJA Nakon ekstrakcionog postupka (datog u eksperimentalnom delu) rezultati dobijeni gasno hromatografskom analizom prikazani su tabelarno. U Tabeli 1. date su koncentracije organohlornih insekticida u heksanu. Heksanje koriscen za rastvaranjc uzoraka dobijcnih nakon preciscavanja pomocu kolone sa Florisilom. Da bi se izbeglc mogucc greske u odredivanju koncentracija organohlornih insekticida u ispitivanim uzorcima micka, neophodna je bila kvantitativna i kvalitativna analiza organohlornih insekticida u heksanu, primenom gasne hromatografije. Koncentracije nadenih organohlornih insekticida u heksanu su vrlo male, reda velicine 10-5 mg/l, sto ukazuje na to da ne mogu uticati na konacne rezultate. Tabela 1. Koncentracije organohlornih insekticida u heksanu Redni br. Vrsta Heksan x 10-5 mg/l O' 'c nije dctcktovano I HCH lj,31 2 Lindan It2X 3 Heptahlor I53,lJ7 4 Aldrin n.d." 5 Heptahlor epoksid n.d. () Endosulfan A n.d. 7 Dieldrin n.d. X Endosulfan B n.d. lj DDT n.d. U Tabeli 2. date su rezidualne koncentracije organohlornih insekticida nadenih u mleku sa podrucja otkupne stanice "Trupale". Svi dobijeni rezultati se krecu u granicama maksimalno dozvoljenih koncetracija organohlornih insekticida (Tabcia 5.). Jedino koncentracija insekticida Heptahlor-a, koja iznosi 6,18 x10 2 mgll, prelazi dozvoljenu granicu za 1,18 xl O:' mgll odnosno 23,6%. 133

4 Tabela 2. Mleko sa podrucja "Trupale' Redni br. Vrsta Mleko sa podrucja "Trupale" x W 2 mg/l 1 HCH 2,90 2 Lindau 1,IK 3 Heptahlor 6,IK 4 Aldrin 4,94 5 Heptahlor epoksid 1,34 (j Endosulfan A 1,37 7 Dieldrin 1,23 K Endosulfan B n.d. 9 DDT n.d. U Tabeli 3. date su rezidualne koncentracije organohlornih insekticida nadenih u mleku "PKB-Imlek" Beograd. Svi dobijeni rezultati krecu se u granicama maksimalno dozvoljenih koncentracija organohlornih insekticida. Jedino odstupanje od ove granice uoceno je kod insekticida HCH (heksahlorheksan). Rezidualna koncentracija insekticida HCH u mleku PKB-Imlek iznosi 5,27 x 1O-2 mg/l sto je za 2,70 x lo-jmg/l odnosno 5,4% vise od maksimalno dozvoljene koncentracije. Tabela 3. Mleko "PKB-Imlek" Beograd Redni br. Vrsta Mleko "PKB-Imlek" x W- 2 mg/l 1 HCH 5, Lindan Heptahlor 1,55 n.d. 4 Aldrin n.d. 5 Hcptahlor cpoksid OJ7 (j Endosulfan A n.d. 7 Dieldrin n.d. K Endosulfan B 0,20 9 DDT n.d. U Tabeli 4. date su kolicine organohlornih insekticida nadenih u mleku "Niska mlekara" Nis. U ovom mleku nadeno je svega tri vrste organohlornih insekticida od ispitivanih devet. Jedino odstupanje od maksimalno dozvoljene koncentracije nadeno je kod insekticida Aldrin dok su ostali rezultati zadovoljavajuci. Nadena koncentracija Aldrina-a iznosi 6,61 xl.o:' mg/l 8tO je za 1,61 xlo 2 mgil odnosno 32,2% vise od maksimalno dozvoljene koncentracije. 134

5 Tabela 4. Mleko "Niska mlekara" Nis Redni hr. Vrsta Mlcko "Nisku mlckara" x 10" mg/l J HCH 4.0! 2 Lindan n.d. 3 Hcptahlor I,RO 4 Aldrin ojil S Heplahlur cpoksid n.d. n Endosullan A n.d. 7 Dieldrin n.d. R Endosulfan B n.d. 9 DDT n.d. U Tabeli 5. date su maksimalno dozvoljene koncentracije (MDK) organohlornih pesticida u mleku, po vazecern zakonu 0 zastiti zdravlja (Sluzbeni list SFRJ 5/92). Tabcla 5. MDK organohlornih pesticida u mleku Reuni hr. Vrsta MDK x 10' mgll 1 HCH S.OO 2 Lindan moo 3 Hcpiahlor S.()() 4 Aldrin S.OO S Hcpiahlor cpoksid S,OO 6 EndllSulfan A 10,00 7 Dieldrin SJ)(! R Enuosulfan B moo 9 DDT S.OO Dobijeni rezultati odredivanja organohlornih insekticida u ispitivanim uzorcima mleka i njihov uporedni pregied, graficki su prikazani na Grafiku 1. IllJMDK Mlcko sa podrueja "Trupa lc" o Mlcko "I'KIl-lmlck" o Mlcko "Niska mlckaru " h g Vrsta lnsckticida Grafik 1. Graficki prikaz dobijenih rezultata gde je: a)hch; b)lindan; c)heptahlor; d)aldrin; e)heptahior epoksid; f)endosulfan A; g)dieldrin; h)endosulfan B; i)ddt 135

6 Kako su odvage mlecne masti ova tri uzorka mlcka bile razlicitc moguce jc dobijcnc rezultate interpretirati i sa drugog aspekta. S obzirom, da se pesticidi vrlo dobro rastvaraju u rnlecnoj masti, sa povecanirn procentom mlecne masti bice povecan sadrzaj i kolicina rastvorenih organohlornih insekticida. Ovo se moze zakljuciti i na osnovu dobijenih rezultata. Nairne, sirovo mleko, odnosno mleko sa podrucja "Trupale" sa najvecim procentom mlecnc masti (odvaga iznosi 3 g mlecnc masti iz 100 g mleka), ima najveci sadrzaj organohlornih insekticida. Moguce jc da sc daljorn tehnoloskorn obradom mleka i oduzimanjem dcla masti iz micka, u cilju proizvodnje ostalih mlecnih proizvoda, smanjuje prvobitni sadrzaj organohlornih insekticida. Zato je u ostala dva uzorka micka, koja su tehnoloski obradena, nadcn manji broj organohlornih insekticida. ZAKUUCAK Na osnovu prikaza rezultata i sprovedene diskusijc moze sc doci do slcdecih zakljucaka: U mleku sa podrucja Trupale nactena je uvecana konccntracija sarno jedne vrste organohlornih insekticida i to Heptahlor-a za 1,18 xl O"mg/L, odnosno za 23,6% vise od maksimalno dozvoljene koncentracije. Koncentracije ostalih vrsta organohlornih insekticida u ovom mleku se krecu u dozvoljenim granicama. U mleku "PKB-Imlek" Beograd, nadena jc uvecana koncentracija jcdnc vrste organohlornih insekticida - HCH, za 2,70 x1o 3 mg/l, oclnosno za 5,4% visa od maksimalno dozvoljene koncentracije. Koncentracije ostalih vrsta organohlornih insekticida u ovom mleku se krecu u dozvoljenim granicama. U mleku "Niska mlekara" Nis, nactena je uvecana konccntracija jcclne vrste organohlornih insektieida - Aldrin-a, za 1,61 xl 0. 2 mg/l odnosno za 32,2% vise od maksimalno dozvoljene koncentracije. Koncentracije ostalih vrsta organohlornih insekticida u ovom mleku se krecu u dozvoljcnim granicama. LITERATURA 1. Vcselinovic S., Grzetic A, Darmati A, A Markovic: Fizicko-hcrnijski osnovi zastite zivotnc sredine, Kniga II, Izvori zagadivanja, posledice i zastita. Univcrzitet u Beogradu, Beograd (1996). 2. Draft International Standard ISO/DIS 8292, Animal and Vegatable Fats and Oils Determination of Solid Fat Content. (1989). 3. Sawyer D.: Pesticide and Industrial Chemical Residues, in Official Methods of Analysis 15 1h Edition. Eds. Bernadette M. McMahon, Harvey W.Newsome, Gail A Parker. Public Records and Documents Center (1990), Burke A: Development of the Food and Drug Andministrations Method of Analysis for Multiple Residues of Organochlorine Pesticides in Food and Feeds. Residue Reviews 34 (1971), Milosavljevic M.: Strukturne instrumentalne metodc, Hcrnijski fakultet, Beograd (1994). 136

7 DETERMINATION OF ORGANOCHLORINE INSECTICIDES IN MILK Petrovic M. Goran, Blaga C. Stojceva Radovanovic This paper covers the qualitative and quantitative determination of nine, the most common in usc, unionised organochlorine insecticides in milk. The investigation was performed on three different specimens of milk. Determination of the traces of the insecticides was performed on the Perkin Elmer gas chromatography with electron capture detector, in hexane as a solvent, by the method of internal standard. Determination of the traces in pure hexane was also performed. The obtained results show that there are minor amounts of investigated insecticides in hexane and insignificant amounts in each specimen of milk. The larger number of insecticides was found in raw milk than in the technologically handled milk. Only one different insecticide in each specimen of milk, was determined in concentration a few percent over the maximum permitted concentration given by the Yugoslav law of public health. Prispeo 12. januara Prihvaccn 20. juna