BACTEC Myco/F Lytic Culture Vials

Transcription

1 BACTEC Myco/F Lytic Culture Vials (Культуралар шишалары) Байытылған Middlebrook 7H9 және Жүрек-мый инфузия бульоны BD BACTEC флуоросцендік сериялық құралдарымен бірге қолдану үшін ҚОЛДАНУ МАҚСАТЫ PP162JAA(02) Қазақ BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар медиумы BD BACTEC флуоросцендік сериялық құралдарымен бірге қолданғанда таңдамалы емес культуралар медиумы болып, аэробтық қан культураларды нығайту мен микобактериялар, ашытқы мен грибоктарды қан сынамаларынан алу үшін қосымша ретінде арналған. Бұл бұйым, стерильді дене сұйықтарында ашытқы мен грибоктардың бар болуы болжамалы болғанда да қоланыла алады. ҚЫСҚА СИПАТТАМАСЫ МЕН ТҮСІНІКТЕМЕ 1980 жылдардың ортасынан және иммунитет тапшылығының таралу уақытынан бастап микробактериялар арқылы пайда болатын грибок, ашытқыш саңырауқұлақтар жане микобактериямен шақыртқан септисемия өсе бастады. Mycobacterium tuberculosis (MTB) және туберкулезден басқа микробактериялар (MOTT), әсіресе Mycobacterium avium комплексіне (MAC) жататындар, қайтадан өмірге келе бастады жылдан 1992 дейін, MTB мен жұқтырылып ауырғандардың саны 18% өсіп кеткені байқалды мен 1987 жылдары арасында, АИТВ аурулардың бақылау қызметі АИТВ аурулардың 5,5% тінде таратылған туберкулездік емес микобактериялар инфекциясы (MAC) бар болғаны байқалды жылға қарай, таратылған туберкулездік емес микобактериялар инфекцияларымен жұқтырылудың жалпы өсімі 7,6% болды жылдарынан бастап фунгемия өсу деңгейі жоғарылап кетуі Байқалады. Осылар. фунгемия мен микобактериялар үшін керекті диагностикалық тәсілдерінің ғарлатты. Ауыру тексеру мен ауру болдырмау орталығы (Centers for Disease Control and Prevention, CDC) лабораторияларға микобактериялар диагностикасы үшін бар болған ең тез түрде әрекет ететін тәсілдерін еңгізу үшін әр мүмкіншілікті қолдануға шақырды. Осы ұсыныстар ішінде микобактериялық культуралар үшін арналған сұйық медиумы да қосылған. 2-4 BD BACTEC флуоросцендік сериялар құралдары Микроорганизмдерді клиникалық сынамаларда жылдам белгілеу үшін арналған. BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар медиумы - микобактерияларды клиникалық қан сынамалардан және ашытқы мен грибоктарды қан мен стерильді дене Cұйықтардан алу үшін арналған Middlebrook 7H9 және Жүрек-мый инфузия бульоны. Микобактериялар, ашытқы мен грибоктардың өсімін нығайту мен осылардың алынуы үшін арнайы өзгерістер жасалынған. Бұл өзгерістер ішіне микобактериялар және ашытқылардың белгілі штамдарына темір қайнарын беру үшін темір аммониум цитраты қосылған, сапонин лизилиялау агенті ретінде еңгізіліп және белгілі протеиндер мен шекер түрлері қосылымдары жұғымтал қосымшасы ретінде еңгізілген. Әр шиша ішінде арнайы сенсор орнатылып, осы сенсор шишадағы микроорганизмдер метаболизмінен және өсуінен пайда болатын оксиген концентрациясының төмендеуін белгілей алады. Сенсор BD BACTEC флуоросцендік сериялар құралдары арқылы оксиген деңгейінің төмендеуіне пропорциялы болған флуоросцен деңгейінің жоғарылауын бақылап отырады. Позитив оқылуы өмірге қабілеттілігі бар микроорганизмдерінің бар болу мүмкіншілігін білдіреді. ҚОЛДАНУ ТӘСІЛІНІҢ НЕГІЗГІ ПРИНЦИПТЕРІ Бұл BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар шишасы қандағы микобактериялар және стерильдік дене сұйықтықтарындағы ашытқы мен грибоктарды жылдам түрде белгілеу үшін арналған. Қан сынамалары BD BACTEC Myco/F Lytic шишасына шприц немесе дерек қан алу арқылы ине мен түтікше арқылы егіледі. Шиша максимальдық нәтиже алу үшін BD BACTEC флуоросцендік сериялар құралына еңгізіліп ұдайы шайқалып 35 C инкубациялану лазым. Жұмыс тексеру протоколы 42 күн. Астыда көрсетілген Организмдер үшін тест протоколы ашытқы үшін 7 күн, грибоктар үшін 30 күн және микобактериялар үшін 42 күн. Әр шиша ішінде арнайы сенсор орнатылып, осы сенсор шишадағы микроорганизмдер метаболизмінен және өсуінен пайда болатын оксиген концентрациясының төмендеуін белгілей алады. Сенсор BD BACTEC флуоросцендік сериялар құралдары арқылы әр он минут бойы тексеріліп тұрады. Флуоросценц өсуі арқылы белгіленіп Мөлшерілетін оксиген деңгейінің төмендеуі BD BACTEC флуоросцендік сериялар құралы арқылы шишаның позитив құралы белгіленуін мүмкін етеді. Позитив оқылуы өмірге қабілеттілігі бар микроорганизмдерінің бар болу мүмкіншілігін білдіреді. Бұл тәсіл 35 C медиум ортасында өсе алатын микроорганизмдерін белгілеу үшін шектелген. Бұл медиум таңдамалы заттарды бөлмей, басқа да, бар болған аэробиялық организмдерге, қоса алғана бактериялар, ықпал ете алады, ашытқымен грибоктармен басқа тез өспейтін микобактерияларын алуымен бірге. Хаттама аяқталғанда негатив болып қалатын және позитив болуының ешбір белгісін көрсетпейтін өскіндері бар шишалары құралдан алынып қалдықтарға тапсыру алдынан стерилизациядан өткізіледі. РЕАГЕНТТЕР BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар шишаларының дайындау алдында құрылымы өменде көрсетілген: Құрылым тізімі Тазартылған су ml жеткілікті мөлшер Фосфат тұздары қосылмаған 7H9 Middlebrook бульон негізі... 0,12% с/м Жүрек-мый инфузия бульоны... 0,5% с/м Казеин Гидролизат... 0,10% с/м H қосымшасы... 0,10% с/м Инозитол... 0,05% с/м 1

2 Глицерол... 0,10% с/м Содиум Полианэтолсульфонат... 0,025% с/м Полисорбит ,0025% с/м Пирокситал HCl... 0,0001% с/м Темір аммониум цитраты... 0,006% с/м Потассиум фосфат... 0,024% с/м Сапонин... 0,24% с/м КөпІршіктенуге қарсы агент... 0,01% с/м Арнайы өнімділік талаптары үшін бұл қоспаның өзгертіле алынуы мүмкін. Бұл BD BACTEC медиум CO 2 және O 2 қосу арқылы дайындалады. BD BACTEC Myco/F Lytic медиумы үшін қосымша қосылуы керек емес. BD BACTEC Myco/F Lytic әр 40 ml шишасы Өзіңізге тапсырылған уақыттан бастап қолдану үшін дайын. Өзіңіз қабылдап алған уақытта медиум түрі ашық және түсі ашық кәріптас түсті болуы лазым. Ескерту мен сақтандару үшін нұсқаулар Іn vitro диагностикалық қолдану үшін арналған. Бұл бұйым ішіне құрғатылған табиғи каучук қосылған. Алыңған сынамаларда гепатит вирусы және Адам Иммун Тапшылығы вирусы (ВИЧ) сияқты патогендік микроорганизмдерінің бар болуы мүмкін. Қан немесе дене сұйықтары түсіп індеттелінген заттар мен бұйымдарды «Стандарттық сақтандыру үшін нұсқаулар» 5-8 мен клиникалық нұсқауларға сәйкес өңдеу керек. Микобактериялар жиналуы мақсат болып қойылса, CDC-NIH нұсқаулары құралды микобактерия жинау үшін керекті қосымша қауіпсіздік мүмкіншілігі бар болған микобактериялық лабораторияға еңгізілуін ұсынады. 9 BD BACTEC Myco/F Lytic шишалары сынама үшін ұсынылған максимальдік 5 ml мөлшерінен жоғары мөлшерімен де жұмыс істей алады. Толтыру процессінің бақылануы керек. Mycobacterium tuberculosis немесе Mycobacterium bovis культуралар ішінде дайындалу мен өзгерту арқылы өткізу әрекеттер үшін, биоқауіпсіздігінің 3-ші деңгейін қауіпсіздік ыдысы мен құралдарының қолданылуы лазым. 9 Қолдану алдында, әр шишаның аса қарауыту, көпіршіктену немесе аса басылып қалған ауыз ашқышы, немесе бұзылып қалған жерлерінің бар болуы тексеріліп алынуы керек. Басқа заттар кіріп індеттелініп немесе бұзылынып қалған шишаларды ҚОЛДАНБАҢЫЗ. Шиша індеттеленуі көрінбейтін болуы мүмкін. Індеттелінген шиша ішінде позитивтік қысым болуы мүмкін. Егер індеттелінген шиша дерек түрде қан алу үшін қолданылса, газ немесе індеттелінген культуралар медиумы пациенттің тамырына қайта кіріп кетуі мүмкін. Сирек жағдайларда, шиша мойынының ашылатын жері шатынап, шиша мойыны, шиша ауызын ашып жатқанда не қолда болған уақытта сынып кетуі мүмкін. Осыдан басқа аса сирек жағдайларда, шиша керекті түрде жабылмай қалуы да мүмкін. Жоғарыда көрсетілген екі жағдайда, шиша ішіндегілер ағып немесе әрдайым қосылып етуі мүмкін. Ішіндегілердің төгіліп кету мүмкіншілігін азайту үшін перманенттік, әрдайым қосылып тұратын инелерін немесе аса қауіпсіздендіріліп енгізілетін BD Luer-Lok фирмасының шприцтерін қолданыңыз. Ине арқылы шаншылып қауіп болып ала алуын болдыртпау үшін лайықты шиша ұстағышын қолдану арқылы бір бір-қолды егу тәсілін қолдану керек. Қалдықтар жинау жеріне тапсыру алдымен егілген BD BACTEC Myco/F Lytic шишаларын бәрін бу құралы арқылы стерилизациядан өткізу лазым. Субкультура немесе бояу үшін позитивтік культуралар шишалары мен т.б.: Сынама тестті бастау алдынан микробтар метаболизмі арқылы жиі пайда болатын газды шығару лазым. Сынама тестті мүмкіншілігі бойынша биологиялық қауіпсіз кабинетте кию керек, лайықты сақтандыру киімін, қолғап пен бет маскасын да бірге кию лазым. Субкультуралар туралы басқа мәліметтер үшін Процедура ТӘСІЛІ бөлімін оқыңыз. Бұйымнан ағылып кету немесе бұзылып қалған шишалар НАЗАРЛАРЫҢЫЗҒА: Бұйымнан ағылып кету немесе бұзылған шиша Микобактерия аэрозолінің, осылардың ішінде M. tuberculosis немесе басқа бактерияларының пайда болуына апара алатын себептен, лайықты дұрыс түрде қолданылуы бақыланып тұруы қажет. Егілген шишадан ішіндегісі ағылап кетіп немесе жинау не тасымалдау уақытында әлдеқалай сынып қалса төгіліп қалған микобактериялар. Өзіңіздің мекемеңіздегі тәсілдерге сәйкес өңдеуіңіз лазым. Ең аз дегенде, «Жалпы сақтандыру нұсқауларын» қолданып әрекет ету лазым. Шишаларды лайықты түрде қалдықтарға тапсыру керек. Шиша ішіндегі құралдың өз ішіне құйылып кеткен сирек жағдайларда, немесе шиша әлдеқалай сынып қалса, құралды қолма-қол өшіріп қойыңыз. Індеттеленіп қалған жерлері босатыңыз. Өзіңіздің мекемеңіздегі Қауіпсіздік үшін жауапты немесе Инфекция Тексеру бөлімінің қызметкерлерімен хабарласыңыз. Індеттеленіп қалыңған жерлері үшін ауа тексеру құралдар параметрлерін өшіріп қою немесе өзгертіп қою керектігін белгілеп қойыңыз. Бар бола алатын аэрозольдердің ауадан кетіп немесе лайықты вентиляция арқылы тазаланып қойылғанға дейін осы жерге қайтып кірмеңіз. Бұл жағдайды АҚШта BD компаниясының диагностика бөліміне телефон соғып немесе басқа елдерде. BD компаниясының жергілікті өкіліне хабарлау керек. Культура шишалары немесе культура түтікшелерінің немесе бульон қосымшалар сынып кетуі арқылы пайда бола алатын әлдеқалай мүмкін бола алатын микобактериялық індеттену жағдайларды лайықты әрекет ету туралы нұсқаулар CDC ішінде берілген. 9 Сақтау туралы нұсқаулар Салқын құрғақ жерде (2 25 C), сақтаңыз. Қараңғыланған жерде ұста. 2

3 Көрсетілген мерзімі аяқталғаннан кейін ҚОЛДАНБАҢЫЗ. СЫНАМА АЛУ НАЗАРЛАРЫҢЫЗҒА: Бұл медиумды, осы бөлімде көрсетілгендей тәсілдерге сәйкес дұрыс түрде сынама ала алу үшін іске еңгізу алдынан арнайы маман тараптардан тексеріп алу керек. Сынамаларды, басқа заттар немесе қан кіріп індеттелену мүмкіншілігін болдыртпау үшін, стерильдік тәсілдерін қолданып отыру керек. Өңделе алынатын қан мөлшері 1 ml ден 5 ml, дейін бола алады, оптимальдік нәтижелер 3 ml ден 5 ml дейін алына алады. Сынаманы төсек үстінде егу ұсынылады. Жалпы, сынама алу үшін шприцпен BD Luer-Lok маркалы қондырмасы қолданылады. Керек болса, BD Vacutainer ине ұстатқышы және BD Vacutainer қан алу жинақтамасы, BD Vacutainer Safety-Lok қан алу жинақтамасы немесе басқа түтікті «көбелек» («butterfly») жинақтамасы қолданыла алады. Егер ине немесе түтікті жинақтамасы (дерек түрде алу) қолданылса, сынама алуды бастау алдынан қан бағытына аса назар аударыңыз. Егу алдында, медиумның толтыру мөлшері қалам немесе маркер арқылы сынама алу уақытынын басталуын белгілеу этикеткасы жазылу керек. Шишадағы вакуум әдетте 5 ml жоғары болады, осыған қарай қолданушы шиша көрсеткішінде шектеу белгісінде 5 ml арқылы жиналғаннан кейін мөлшерді тексеріп бақылап тұру қажет. Талап етілген 1 5 ml алыңғаннан кейін, түтікті жинап бүкіл түтік жинақтамасын BD BACTEC шишасынан алу арқылы ағымды тоқтату лазым. Егілген BD BACTEC шишасы мүмкіншілігінше тез лабораторияға жеткізіп BD BACTEC құралына еңгізілуі лазым. Сары қондырмасы бар BD Vacutainer маркалы SPS қосылған түтікше пациенттен қан алу үшін жарамды. BD BACTEC культуралар шишасына егу үшін түтікшенің мүмкіншілігінше тез лабораторияға жеткізілуі лазым. ТӘСІЛІ Қорапшадағы бұйымдар: BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар шишалары Керекті, бірақ қорапшаға қосылмаған бұйымдар: Биологиялық қауіпсіз кабинет, аутоклав, бұрылым құралы, микобактерия дезинфекциялау агенті, 70% изопропил алкоголь, Сапа тексеру организмдері (Mycobacterium intracellulare, ATCC 13950; Candida glabrata, ATCC 15545; және Cryptococcus neoformans, ATCC 13690), микроскоп және бөлімшелер түсін тексеру үшін материал мен субкультуралар үшін шишалар. BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар шишаларын егу 1. BD BACTEC шиша үстіндегі шиша мойынның бөлініп ашылатын ауызын ашып, шишада сынып қалған, індеттілген, аса карауытып кеткен, және аса толып немесе ішіне қарай кіріп кеткен жері болған болмағанын тексеріп алыңыз. Егер бұзылған бір жерлері көрініп қалатын болса ҚОЛДАНБАҢЫЗ. 2. Культуралар шишасына сынама идентификациялау белгісін орнатып шиша этикеткасына медиум деңгейін белгілеу лазым. 3. Егу алдымен септумды алкоголь сүртіндісімен сүртіп алыңыз. Шприцті асептикалық түрде еңгізіп немесе сынаманы дерек түрде деңгей көрсететін шиша этикеткасымен өлшеп алып әр шиша үшін сынаманың 1 5 ml еңгізіңіз (Тәсіл Шектелуі бөлімін оқыңыз). Егілген шишалар BD BACTEC флуоросцендік сериялық құралдарына инкубация және бақылау үшін мүмкіндігінше тезірек енгізілуі керек. 4. Құралға еңгізілген шишалар тест протокол жазу уақытында әр он минут бойынша автоматикалық түрде тексеріліп тұрады. Жұмыс тексеру протоколы 42 күн. Өменде көрсетілген организмдер үшін тест протоколы ашытқы үшін 7 күн, грибоктар үшін 30 күн және микобактериялар үшін 42 күн. Протокол уақытын еңгізу үшін BD BACTEC Қолдану туралы нұсқауларын оқыңыз. Егер тест уақыты соңында негатив BD BACTEC Myco/F Lytic шишасы позитив болып көріне қалса (дегенмен, шоколад түсті қан, аса толғып кеткен септум, лизияланған және/немесе қарайтылып қалған қан), ол субкультуралар үшін сақталып, Грам бойынша бояу (Gram-stained) және болжамалы позитив шиша ретінде қолданылуы керек. 5. Позитив шишалар BD BACTEC флуоросцендік сериялық құралдары арқылы белгіленеді. Шиша ішіндегі сенсор позитив және негатив нәтижелерінде көзге әртүрлі болып көрінбейді, алайда BD BACTEC флуоросцендік сериялық құралдары флуоросцен ішінде болған айырмашылықтарды белгілей алады. Позитив шишалардың бәрі Биологиялық қауіпсіз кабинетінде өңделуі лазым. 3-ші биоқауіпсіздік деңгейі, қауіпсіздік құралдар және тәсілдерінің қолданылуы ұсынылады. Позитив нәтиже көрсеткен шишалар субкультуралар үшін қолданылып және лайықты жағыңқы дайындалуы қажет. Құралы-позитив шишаны өңдеу тәсілі a) Шишаны құралдан шығарып, биологиялық қауіпсіз кабинетіне еңгізіу лазым. б) Шишаны араластыру қосымдар ішіне еңгізіңіз. в) Шиша қысымын атмосфера арқылы теңдеу үшін ішінен ауаю шығарыңыз. г) Штамм дайындау үшін (AFB және Грам) шишадан (мөлшері. 0,1 ml) аликотты шығарып алу керек. д) Жағыңқыны тексеріп алып, алдын ала шығарылған нәтижелерді тек қана жағыныңқы тексеруден кейін баяндаңыз. Субкультуризациялау: Сынама тестті мүмкіншілігі бойынша биологиялық қауіпсіз кабинетте өткізу лазым, лайықты сақтандыру киімін, қолғап пен бет маскасымен де бірге кию қажет. Субкультуризация алдынан, шишаны тікшіл тұра қойып, септум үстінен алкоголь қосылған сүрткішті қойыңыз. Мүмкін болған індеттеу агенттер өсімі арқылы пайда бола алатын позитив қысымын шишадан шығару үшін лайықты фильтрі немесе қонымдысы бар. мөлшері 25-gauge (немесе одан да кіші) стерильді инені алкоголь сүртіндісі және септум үстінен еңгізу лазым. Шишадағы қысымды шығарып алғаннан кейін және сынаманы субкультуризациялау үшін шишада тексеру алдынан инені қайтадан шығарып алу керек. Иненің еңгізілуі және шығарылуы бір тұра әрекетте өткізілуі крек, ешбір бұрылым әрекет жасалмауы керек. Инені қайтадан қолданбаңыз. Инелер мен шприцтерді тесілуге қарсы тұрақты биологиялық қауіпті қалдықтар үшін арналған контейнеріне тапсырыңыз. 3

4 САПА ТЕКСЕРУІ Сапа тексеру талаптары Күшіндегі жергілікті, мемлекеттік және/немесе федеральдік заңдарына сәйкес немесе аккредитация талаптары және өзіңіздің стандарт Сапа тексеру тәсілдеріңізге сәйкес өткізілуі керек. Қолданушыға лайықты Сапа тексеру өткізу үшін ұқсас Американың Клиникалық Лаборатория Стандарттары Комитетінің CLSI нұсқауларына және Клиникалық Лаборатория жұмысын Жақсарту туралы Өзгертулер (Clinical Laboratory Improvement Amendments, CLIA) ережелеріне назар аударуды ұсынамыз. BD BACTEC Myco/F Lytic медиялардың әр жаңа жеткізіліп берілген қорапшасын төмендегі суретте позитив тексеру ретінде белгіленген ATCC тексеру организмдері арқылы және негатив болып еңгізілмеген шишаны тесттен өткізу ұсынылады. Организм Уақыт-пен-белгілеу арасындағы уақыт (күндер) Mycobacterium intracellulare, ATCC Candida glabrata, ATCC < 3 Cryptococcus neoformans, ATCC < 3 Позитив шишаларды тұрақты медиумда өскен McFarland #1 қосылымының 1:100 қолданыла отырып егу керек. Шишаны араластырылған культураларының 0,1 ml мөлшерінде егіңіз. Осы шиша мен бір егізілмеген шиша құралға кіргізіліп, тексерілуі керек. Егізілген шишаның тест протокол уақыты ішінде позитив болып белгіленуі лазым. Негатив тексеру шиша негатив болып қала беруі лазым. Егер Сапа тексеру үшін шығарылған нәтижелері болжамдағы нәтижелеріндей болмаса, медиумды қолданбай, көмек алу үшін BD компаниясының жергілікті өкілімен хабарласыңыз. BD BACTEC жүйесі үшін Сапа тексеру туралы басқа мәлімет оқу үшін, BD BACTEC Пайдаланушыға нұсқаулықты оқыңыз. НӘТИЖЕЛЕРДІ БАЯНДАУ Құралы позитив болған шиша қышқылға тұрақты жағыңқы немесе Грам түстеу арқылы расталуы керек. Позитив оқылуы өмірге қабілеттілігі бар микроорганизмдерінің бар болу мүмкіншілігін білдіреді. AFB жағыңқысы немесе Грам түсi позитив болса, оны тұрақты медияларда субкультуризациялап төменде көрсетілгендей баяндау лазым: Құралы позитив, AFB жағыңқы немесе Грам түсi позитив, ID белгіленбеген. Жағыңқыда микроорганизмдер бар болмаса, оларды тұрақты медияларда субкультуризациялап, шишаны, әріғарай негатив деп белгілеп қайтадан құралға еңгізіп тест протоколының бітуіне дейін күтіңіз. Идентификациялау мен сезімталық тестінен өткізу үшін BD BACTEC Myco/F Lytic шишасынан субкультураларды өңдеңіз. ҚОЛДАНУ ШЕКТЕЛУІ BD BACTEC Myco/F Lytic шишалары таңдамалы емес болып, микобактерия, ашытқы және грибоктардан басқа аэробикалық организмдерінің өсуін де нығайтады. Позитив шишаларда микобактерия және/немесе басқа, микобактерия емес түрлерінің бір немесе бірнешесі бар болуы мүмкі. Бар болған жағдайда, тез өсіп бара жатқан организмдер ақрынрақ өсіп жатқан микобактерия, ашытқы немесе грибоктардың белгіленуін жасыруы мүмкін. Субкультуризациялау мен қосымша тәсілдер керек болып талап етіледі. BD BACTEC Myco/F Lytic бұйымындағы микроскопиялық морфологиясының тұрақтығы орнатылмаған. Егу үшін қан мөлшерінің 1 5 ml болуы жеткілікті болып саналады, алайда оптимальдік нәтижелер алу үшін қан мөлшерінің 3 5 ml болуы ұсынылады. Қан мөлшері 3 ml ден азырақ болған сынамаларымен өткізілген клиника ішінде интерн өткізілген зерттеулерде, M. intracellulare, M. malmoense, M. haemophilum және M. xenopi белгілеу уақытының кешігуін жәненемесе BD BACTEC Myco/F Lytic бұйымымен бірге төмендетілген деңгейлі нәтижелер көрсетті. Қан мөлшері 5 ml жоғары болса қате түрде позитив болу мүмкіншілігінің өсуі көрінді. Сынама алу және сынманы BD BACTEC шишасына егу уақытында індеттенбеу үшін сақтандыру жұмыстары өткізілуі лазым. Індеттелінген сынама позитив болып көрсетілсе де жарамды клиникалық сынамасын білдіртпейді. Белгіленген организмдер, осы организмдердің түрлі культураларында бар болуы, пациент тарихы мен т.б. қарай отырып айырмашылық жасау керек. Микобактерияларының, штаммдарына қарай қышқыл ортадағы жылдамдылығы, культуралар жасы мен басқа факторлерге қарай өзгеріп тұрулары мүмкін. Қан ішінде микроорганизмдер өсімін баяулата немесе болдыртпай алатын антимикробтық немесе басқа ингибиторлары болуы мүмкін. BD BACTEC Myco/F Lytic шишалар 35 C деңғейде басқа инкубация температурасын талап ететін микобактериялар түрлерін болмауын тексеріп алып (мысалы, M. marinum, M. ulcerans, M. haemophilum) инкубациялау лазым. Осындай организмдерді белгілеп алу үшін қосымша культураларының тәсілдері керек болып талап етіледі. Penicillium purpurescens және Blastomyces dermatitidis BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар медиумында белгіле алынбады. Hansenula anomala, Exophiala jeamselmei, Actinomyces bovis, Rhodotorula rubra, және Mucor ramosissimus төмен инокулум деңгейлерде егілген культуралар зерттеулерінде тұрақсыз нәтижелер көрсетті (< 10 CFU/vial). Осындай организмдерді белгілеп алу үшін қосымша культураларының тәсілдері керек болып талап етілуі мүмкін. Төмендегі изоляттар BD BACTEC 9240 құралында BD BACTEC Myco/F Lytic медиумымен бірге қолданғанда интерн егілген зерттеулер және/немесе клиникалық зерттеулерде позитив болып белгіленді: Mycobacterium terrae Mycobacterium abscessus Cryptococcus neoformans Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium xenopi Histoplasma capsulatum Mycobacterium avium Mycobacterium malmoense Aspergillus flavus Mycobacterium kansasii Mycobacterium haemophilum Aspergillus fumigatus 4

5 Mycobacterium fortuitum Candida albicans Nocardia asteroides Mycobacterium intracellulare Candida glabrata Malasezzia furfur Mycobacterium gordonae Candida parapsilosis Trichophyton rubrum Mycobacterium szulgai Candida krusei Mycobacterium simiae Candida tropicalis Mycobacterium celatum Ajellomyces dermatitidis БОЛЖАМАЛЫ НӘТИЖЕЛЕР Микобактерия, ашытқы немесе грибок инфекциялар бар деп болжамдалған пациенттерден алыңған 1488 қан культуралары сынамалары BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар шишасында BD BACTEC 9240 қан культуралар жүйесін қолданылып алынды. Осылардың ішінде 243 клиникалық мағыналы организмдері белгіленген 315 позитив культурасы табылып, олардың 131 (53,9%) микобактерия болып, 35 (14,4%) ашытқы немесе грибоктар және 77 (31,7%) басқа бактериялары болды. Осы клиникалық зерттеуде тексерілген 1488 қан сынамаларында, онбір BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар шишалары (0,7%) қате түрде позитив деп белгіленіп (құралы-позитив, жағыңқы және/немесе субкультурасы-негатив). Осы 315 құралы-позитив BD BACTEC Myco/F Lytic шишалардың, 11 (3,5%) қате позитив деп белгіленді. Осы клиникалық зерттеуде тексерілген 1488 қан сынамаларында, бірі (1) BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар шишасы (0,07%) қате түрде негатив деп белгіленіп (құралы-негатив, жағыңқы және/немесе субкультурасы-позитив). Осы 1173 құралы негатив BD BACTEC Myco/F Lytic шишаларынан, бірі (0,08%) қате түрде негатив деп белгіленді. Осы тексеру уақытында болған індеттену деңгейі 3,3% болды. BD BACTEC Myco/F Lytic культуралық шишаларының BD BACTEC 9000 қан культуралары жүйесімен бірге қолданылғандағы позитив нәтижелі сынамалары уақыт және белгілеуге дейінгі мерзімі (күндер\ttd) микобактерия үшін 1 СУРЕТТЕ, ашытқы мен грибоктар үшін 2 СУРЕТТЕ көрсетілген. 1 СУРЕТ 2 СУРЕТ 5

6 ЖҰМЫС СИПАТТАМАСЫ BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар медиумы емес жоғары оқу орындарының жерлерінің клиникаларында BD BACTEC 9240 құралы мен бірге төрт клиникалық зерттеулер өткізілді. Тестке қатысушылар ішінде ВИЧ инфекциясымен індеттелінген пациенттер, иммун жүйесі әлсіз пациенттер, трансплантация алған пациенттер және микобактерия инфекциясы бар деп болжамдалған пациенттер болды. BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар медиумы мен BD BACTEC 13A культуралар медиумы қаннан ашытқы мен микобактерия сынамаларын алу үшін бір-бірімен салыстырылған. Осы зерттеу жұмысы уақытында 1100 тең қан сынамалары тексерілді. Зерттеуде белгіленген патогендік микобактерияларының жалпы саны 111 болды (1 СУРЕТТІ оқыңыз). Осы позитивтерден, оны (9%) тек қана BD BACTEC Myco/F Lytic медиумында және үші (3%) тек қана BD BACTEC 13A медиумында белгіленді. 1 СУРЕТ: MYCO/F LYTIC КУЛЬТУРАЛАР МЕДИУМЫНЫҢ КЛИНИКАЛЫҚ ЗЕРТТЕУ УАҚЫТЫНДА АЛЫНҒАН ИЗОЛЯТТАРЫ Организм Бүкіл изоляттар Тек қана Myco/F Lytic медиумы Тек қана 13A медиумы Екеуі де Патогендік микобактерияларының бәрі Mycobacterium avium Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium celatum Жалпы BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар медиумы жоғары оқу беру жерлерінің клиникаларында BD BACTEC 9240 құралы мен бірге төрт клиникалық зерттеулер өткізілді. Тестке қатысушылар ішінде ВИЧ инфекциясымен індеттелінген пациенттер, иммун жүйесі әлсіз пациенттер, трансплантация алған пациенттер және грибок инфекциясы бар деп болжамдалған пациенттер болды. BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар медиумы мен ISOLATOR System (Wampole Laboratories, Cranbrook, NJ) культуралар медиумы қаннан ашытқы мен грибок сынамаларын алу үшін бір-бірімен салыстырылған. BD BACTEC Myco/F Lytic шишалары қанның 1 5 ml егіліп, ISOLATOR түтікшілері қанның 3 10 ml of егілген. ISOLATOR седименті Шоколад Агары, 5% қой қаны қосылған Жүрек-мый инфузия агары, және Sabouraud декстроза агарына қосылып өңделіп өзгертіледі. Осы зерттеу жұмысы уақытында 748 тең қан сынамалары тексерілді. Патогендік ашытқы және грибок изоляттарының жалпы саны зерттеу уақытында 32 болған (2 СУРЕТТІ оқыңыз). Осы позитивтерден жетеуі (22%) тек қана BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар медиумында, екісі (19%) тек қана ISOLATOR жүйесінде белгіленді. 2 СУРЕТ: MYCO/F LYTIC КУЛЬТУРАЛАРЫНЫҢ КЛИНИКАЛЫҚ ЗЕРТТЕУ УАҚЫТЫНДА АЛЫҢҒАН ИЗОЛЯТТАРЫ Организм Бүкіл изоляттар Тек қана Myco/F Lytic медиумы Тек қана изолятор Екеуі де Патогендік грибоктарының бәрі: Candida albicans Candida glabrata Candida krusei Candida parapsilosis Candida tropicalis Cryptococcus neoformans Fusarium түрлері Histoplasma capsulatum Жалпы ЖЕТКІЛІКТІГІ Кат. Сипаттама BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар шишалары, 25 шишалар қорапшасы BD BACTEC Myco/F Lytic культуралар шишалары, 50 шишалар қорапшасы 6

7 РЕФЕРЕНЦИЯЛАР 1. Horsburg Jr., C.R Mycobacterium avium Complex Infection in the acquired immunodefieciency syndrome. New England Journal of Medicine 324: Tenover, F.C., et al, The resurgence of Tuberculosis: Is Your Laboratory Ready? Journal of Clinical Microbiology 31: Isolation and Identification of Mycobacterium tuberculosis: A Guide for the Level II Laboratory. U.S. Department of Health and Human Services, Atlanta, GA, Kent, P.T., and G.P. Kubica Public Health Mycobacteriology: A Guide for the Level III Laboratory. U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA. 5. Clinical and Laboratory Standards Institute Approved Guideline M29-A3. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 3rd ed. CLSI, Wayne, Pa. 6. Garner, J.S Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17: U.S. Department of Health and Human Services Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 5th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 8. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. U.S. Department of Health and Human Services Public Health Service/Centers for Disease Control, Atlanta, GA, May 1988 pp Служба технической поддержки BD Diagnostics: BD компаниясының жергілікті өкіліне хабарласыңыз. 7

8 Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, MD USA Benex Limited Pottery Road, Dun Laoghaire Co. Dublin, Ireland Australian Sponsor: Becton Dickinson Pty Ltd. 4 Research Park Drive Macquarie University Research Park North Ryde, NSW 2113 Australia ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. BD, BD Logo, and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company BD. 8